بهبود فعاليت و پايداري همزمان پروتئاز باكتري بومي با روش جهش زايي هدفدار

به گزارش گروه علمي «شبكه خبر دانشجو»، با توجه به دشواري هاي فراوان بهبود همزمان پايداري و فعاليت در آنزيم ها، فهم مكانيسم مناسبي براي بهبود همزمان اين دو پارامتر از زمينه هاي مورد توجه در مطالعات بنيادي و كاربردي است.

در اين زمينه مطالعات فراوان مهندسي پروتئين بر روي آنزيم هاي خانواده ترموليزين صورت گرفته است؛ زيرا اين آنزيم ها از يك سو اهميت فراواني در صنعت دارند و از سوي ديگر مدل هاي ساختماني مناسبي جهت مطالعات بنيادي به شمار مي آيند.

دكتر سيد محسن اصغري با تشريح هدف اين پژوهش كه در قالب رسانه دكتراي تخصصي خود انجام و ارائه داده است، گفت: هدف از اين تحقيق، بهبود همزمان فعاليت و پايداري در يك thermolysin – likeprotease حاصل از باكتري بومي salinovibrio proteolyticus است كه بدين منظور هفت جهش نقطه اي با روش site- directed mutagenesis طراحي شد و به انجام رسيد.

وي در ادامه افزود: جهت دستيابي به بهترين واريانت، چهار جهش كه موجب بهبود همزمان هر دو خصوصيت شدند با يكديگر تركيب شد.

فعاليت آنزيم بدست آمده در دماي بهينه عملكرد آنزيمي، به اندازه 50 برابر فعاليت آنزيم وحشي در دماي بهينه عملكرد آن بهبود يافت.

مطالعات ساختاري انجام شده نشان داد كه جهش هاي صورت گرفته با تغيير در زاويه لولاي مابين دمين هاي N – و C – ترمينال موجب تغيير فعاليت و پايداري آنزيم هاي مهندسي شده هستند؛ اين نتايج امكان بهبود همزمان فعاليت و پايداري از يك منشا ساختاري را به اثبات مي رساند.

لازم به ذكر است، اين پژوهش با راهنمايي دكتر خسرو خواجه و با مشاوره دكتر حسين نادري منش و دكتر مجيد صادقي زاده در دانشكده علوم پايه دانشگاه تربيت مدرس انجام شد./انتهاي پيام/