طراحي روش MultipleX RT- PCRELISA جهت تشخيص همزمان ويروس ايدز و هپاتيت C
به گزارش گروه علمي «شبکه خبر دانشجو»، عليرغم غربالگري خون هاي اهدايي با روش هاي حساس مبتني بر شناسايي آنتي بادي، همچنان خطر انتقال عفونت هاي ويروسي وجود دارد، كه با طراحي روش هاي حساس مبتني بر شناسايي اسيد نوكلئيك مورد توجه قرار گرفته است.
زهرا خانلري، دانش آموخته رشته ويروس شناسي دانشگاه تربيت مدرس، كه اين روش در قالب تحقيقات پايان نامه كارشناسي ارشد وي ابداع شد، ضمن بيان مطلب فوق در خصوص هدف پژوهش خود گفت: هدف از اين تحقيق طراحي روشي حساس تر در مرحله شناسايي نسبت به روش هاي معمول و همچنين تشخيص همزمان عفونت هاي ويروس نقص ايمني اكتسابي تيپ 1 و ويروس هپاتيت C در يك نمونه مي باشد.
وي در تشريح مراحل تحقيق و اجراي طرح خود افزود: پس از طراحي پرايمرها و پروب هاي اختصاصي دو ويروس و بهينه سازي روش واكنش زنجيره اي چندگانه، مرحله نشاندار كردن محصول با استفاده از نوكلئوتيدهاي متصل به ديگوگسي ژنين انجام شد.
محصول بدست آمده ابتدا به دو قسمت مجزا تقسيم و پس از واسرشت شدن در شرايط قليايي با پروب اختصاصي مجاور گرديد، پروب هاي حاوي بيوتين انتهايي پس از اضافه شدن به پليت پوشش يافته با استرپت آويدين متصل شدند كه پس از شستشو، آنتي بادي ضد ديگوگسي ژنين متصل به آنزيم آلكالن فسفاتاز به چاهكها اضافه شد.
همچنين، در مرحله نهايي شسته شد و سوبسترا اضافه گرديد كه با استفاده از روش رنگ سنجي نمونه هاي مثبت و منفي از نظر عفونت قابل شناسايي هستند.
پژوهشگر دانشگاه تربيت مدرس با اشاره به نتايج حاصل گفت: 35 نمونه با روش طراحي شده مورد آزمايش قرار گرفتند، كه شامل 27 نمونه مثبت و 8 نمونه منفي تائيد شده بودند و هيچگونه نتيجه مثبت يا منفي كاذب مشاهده نگرديد.
وي اضافه كرد: روش طراحي شده داراي حساسيت و اختصاصيت قابل قبولي براي تشخيص عفونت هاي HIV-1 و HCV مي باشد، به علاوه امكان كمي كردن روش وجود دارد كه در كنترل بيمار و پايش درمان مفيد است.
همچنين در كنار حساسيت بسيار بالا، هزينه و زمان كمتري براي انجام تست نياز است.
گفتني است اين پژوهش با راهنمايي دكتر مهرداد روانشاد، عضو هيئت علمي دانشكده علوم پزشكي دانشگاه انجام شد./انتهاي پيام